由于寡核苷酸從頭合成長(zhǎng)度的限制，通常采用DNA組裝技術(shù)、使用短寡核苷酸作為原料來(lái)構(gòu)建更長(zhǎng)的合成片段。常用的組裝方法包括全片段酶促連接法和酶促填充法。全片段酶促連接法利用DNA連接酶將具有5'磷酸化且重疊互補(bǔ)的寡核苷酸片段連接形成雙鏈DNA。酶促填充法基于聚合酶循環(huán)組裝(Polymerase Cycling Assembly，PCA)技術(shù)，使用DNA聚合酶將重疊的寡核苷酸延伸成雙鏈片段，通過(guò)overlap PCR獲取較長(zhǎng)片段，然后將各片段一起組裝至載體上，最終構(gòu)建出完整載體。

圖1.擎科生物基因合成流程圖

擎科生物的基因合成智能化生產(chǎn)平臺(tái)能夠?qū)崿F(xiàn)1.5 kb以內(nèi)短片段的自動(dòng)化生產(chǎn)，有效減少人工操作失誤，大幅提高生產(chǎn)效率�？蛻艨梢愿鶕�(jù)不同的應(yīng)用需求選擇合適的載體骨架。擎科生物建立了一個(gè)準(zhǔn)確規(guī)范的載體庫(kù)，提供160多個(gè)免費(fèi)載體供選擇，并按需制備合格的線性化載體。同時(shí)，我們對(duì)客戶自備載體進(jìn)行NGS測(cè)序驗(yàn)證，確保序列準(zhǔn)確，并提供免費(fèi)存儲(chǔ)服務(wù)，方便后續(xù)使用。

擎科生物自主研發(fā)的高品質(zhì)重組酶、聚合酶和感受態(tài)細(xì)胞，確保載體構(gòu)建過(guò)程高質(zhì)高效。全流程試劑控制確保每個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量。載體與PCR片段的連轉(zhuǎn)反應(yīng)由自動(dòng)移液工作站操作，復(fù)蘇液通過(guò)自動(dòng)涂布儀進(jìn)行樣品涂布，并利用全自動(dòng)菌落挑選儀篩選陽(yáng)性克隆，支持二維碼和條形碼管理，大幅提高生產(chǎn)效率，減少人工失誤。擎科生物還自主開發(fā)了"磁珠法測(cè)序平臺(tái)"用于Sanger測(cè)序，確保目的序列100%準(zhǔn)確，并采用創(chuàng)新的NGS測(cè)序技術(shù)——Fast NGS，保障全質(zhì)粒序列的準(zhǔn)確性。在智能化基因合成生產(chǎn)線的支持下，基因合成交付率超過(guò)99.5%，最快可在3天內(nèi)完成交付。

最后讓我們一起深入了解擎科生物的智能化產(chǎn)線。以下這段視頻將展示從自動(dòng)化序列分析到篩選、測(cè)序和質(zhì)檢，每一步都在精密的控制下進(jìn)行，確�；�因合成的高效率和高質(zhì)量。

(新媒體責(zé)編：wa12)